10月24日上午9时，美国先后出动183艘军舰组成的“一三六特混舰队”抵达加勒比海、佛罗里达海峡和尤卡坦海峡执行巡航；各型侦察机和战斗机密切监视着封锁区内外的舰机行动，50%的战略轰炸机载着核武器不断在古巴上空盘旋，核潜艇也进入作战阵地。海军陆战队也整装待命……
为了实施有效的隔离，美国在加勒比海集结了各型军舰180余艘；4万名海军陆战队员；空军B-52战略轰炸机分散到全国各地的民用机场，以防万一遭到对方袭击时可以减轻损失，同时，部署B-52轰炸机携载核武器升到空中待战，担负战备值班，当值班飞机需要着陆补给燃料，另一架立即起飞接替；陆军调集了25万部队驻在与古巴隔海相望的佛罗里达州；5万名伞兵集结待命，另有1.4万名后备役人员应召，随时准备执行任务。美军首先确定了海上隔离封锁区域。由于从前苏联至古巴的航线犹如瓶颈般北大南小，驶向古巴的前苏联船只大多从北大西洋方向驶来，巴哈马群岛和小安的列斯群岛是其必经航线，因此，美军就在这个海域实施重点隔离封锁。
对于隔离区域大小的设定，美国海军曾提出了距古巴800海里实施隔离的方案，其主要考虑是尽量避开驻在古巴的米格飞机的作战半径，减少不必要的损失。然而，由于封锁范围过大，当时前苏联的船队已距此不远，如果依据这个范围进行隔离，在隔离生效后，很快就可能进行第一次拦截。为了让前苏联有更多的时间分析当前的态势，美国最后决定在距古巴500海里的海域实施海上隔离封锁。于是，10月23日，美国宣称距离古巴500海里半径内的海空区域为“海上隔离区”。美国海军将拦截可能前往古巴的舰船，勒令这些舰船听候美国人的检查；凡飞往古巴的运输机也将遇到拦截，迫令降落在一个美国机场听候检查，否则予以击落；对于被发现的苏联潜艇，如未见其“升上水面”的信号，将用深水炸弹予以炸毁。
为了阻止苏联将导弹再次运进古巴，美军在古巴领海周围，设置了警戒线，把由大西洋通往古巴的5条航道全部封锁起来。近百艘舰艇在空军和航空母舰护卫下，驶入警戒线海域，在距古巴东端300多千米的一条巨大的弧线上摆开，拦截和搜寻驶往古巴的船只。美海军专门在佛罗里达至波多黎各一线布置了一支强大的“隔离舰队”作为封锁线的前哨。这支舰队由航空母舰“黄蜂”号、3艘巡洋舰、16艘驱逐舰和6艘运输船组成，专事检查、阻止，并于必要时损坏（而不是击沉）那些驶往古巴的可能载有导弹装备的苏联船只。
为了避免在拦截中可能导致的军事冲突甚至引发核大战，当时的联合国秘书长、缅甸人吴丹仍在进行不懈的外交斡旋。他给赫鲁晓夫和肯尼迪发出了内容相同的信，向双方紧急呼吁暂停行动两三个星期。他要求，一方自动停止向古巴运送一切武器；另一方自动停止封锁行动，特别是对驶往古巴船只的检查，因为“人类的命运危如累卵”。
然而，大西洋上的行动并没有因此而停止。上午10时许，两艘苏联船只“加加林”号和“科米莱斯”号作为先导，正向美国隔离舰队方向驶来，距离拦截线只有几海里之遥。而一支由25艘舰船组成的苏联护航运输船队已航行在一望无际的北大西洋上，正向哈瓦那驶来。此时处于临战状态的美海军反潜航空母舰和战斗舰艇编队迅速向苏联船队靠拢，舰载飞机一架接一架地从船队上空掠过。
战争一触即发。关键看苏联船只敢不敢于向封锁线再跨近一步。
10时25分，美国海军舰队指挥官接到报告苏联船只在封锁线附近停止不前了。又过了7分钟，报告说驶向古巴的20艘苏联船只都在拦截线旁停了下来，先是6条，后来其余的都掉头开回去了。就这样，一场即将爆发的海上战争甚至是核战争，最终因苏联船队的撤回而得到了避免。
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